Non enzymatic isolation of adipose tissue and stromal vascular fraction derived cells

Abstract

The therapeutic potential of the adipose tissue is also supported by a source of mesenchymal stem cells (MSCs), endothelial progenitor cells, mast cells, T- lymphocyte, B lymphocyte, and adipose-resident macrophages with repairing and regenerative ability. The purpose of this study was to compare adipose tissue derived mesenchymal stem cells (ADSCs) and stromal vascular fraction cells (SVF cells) in terms of the usage of non-enzymatic isolation, detection of cell adhesion, fibroblastoid cell formation, properties of cell population, cell culture duration until 3rd passages under in-vitro culture condition. We used 3 months old, 4 male Sprague Dawley rats (mean of live weight about 250 g) to examined the variation of the cell population, cell properties, phases of cellular formation, cell culturing time, subculturing duration, differences in confluency between SVF cells and ADSCs. In in-vitro expansion, ADSCs displayed higher rate of adhesiveness, homogenous cell population, faster proliferation and formation of fibroblast like cells compared to SVF cells. As a result, we showed that ADSCs have better adhesive ability, higher proliferative capacity in all of the 3 passages and require shorter time to reach confluency compared with SVF cells in vitro. These findings may contribute to future studies that deal with isolation and selection of stem cells from various tissues, as well as design clinical trials based on ADSCs and SVF cells.

Adipoz dokusunun terapötik potansiyeli; mezenkimal kök hücreler (MKH) ile desteklenmesinin yanında endotel progenitor hücreleri, mast hücreleri, T lenfositleri ve adipoz dokusundaki makrofajların etkisi ile tedavi ve rejenerasyon potansiyeli ile de desteklenmektedir. Bu çalışmanın amacı; adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücreler (ADMKH) ve stromal vasküler fraksiyon kökenli hücrelerin (SVF hücreleri) non enzimatik hücre izolasyonu yöntemi, hücrelerin plastik yüzeye tutunması, fibroblastoid yapının oluşumu, hücre populasyonunun özellikleri, 3. pasaja kadar in vitro kültür yönünden karşılaştırılmasıdır. Bu çalışmada, SVF hücreleri ve ADMKH'lerin arasındaki; hücre popülasyonu, hücrelerin yapısal özellikleri, hücresel gelişim fazları, hücre kültür süresi, subkültür süresi, konfluensinde bulunan farklılıkları incelemek için 3 aylık yaştaki, 4 erkek Sprague Dawley ırkı sıçan (ortalama canlı ağırlıkları yaklaşık 250 g) kullandık. İn vitro ekspansiyonda, SVF hücreleri ile karşılaştırıldıklarında ADMKH’ler; yüksek oranda hücresel tutunma, hızlıca fibrolastoid hücre yapısını oluşturma, homojen hücre populasyonu, daha hızlı proliferasyon gösterdi. Sonuç olarak, ADMKH’lerin her 3 pasajda daha fazla oranda plastik yüzeye tutunduğu, daha yüksek proliferasyon kapasitesine sahip olduğu ve in vitro kültürde SVF hücrelerinden daha kısa sürede konfluense ulaştığını gözlemledik. Bu bulgular, çeşitli dokulardan kök hücrelerin izolasyonu ve seçimi ile ilgili ileriki çalışmalara katkıda bulunmasının yanı sıra, ADMKH'ler ve SVF hücreleriyle yapılan klinik deneylerin tasarlanmasına da katkı sağlayacaktır.